1、检验原理
霉菌和酵母菌数测定(Determination of molds and yeast count)是指化妆品检样在一定条件下培养后,1g或1ml化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量,籍以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性,在虎红培养基上,置28℃±2℃培养72h,计算所生长的霉菌和酵母菌数。
2、仪器和设备
培养箱:28℃±2℃;振荡器;天平;三角瓶:250ml;试管:15×150mm;平皿:直径9cm;吸管:1ml、10ml;量筒:200ml;酒精灯; 高压灭菌器
3、培养基和试剂℃
1)生理盐水
与细菌总数测定用的生理盐水一致。
2)虎红﹙孟加拉红﹚培养基
制法:将上述各成分﹙除虎红外﹚加入蒸馏水中溶解后,再加入虎红溶液分装后,103.43kpa﹙121℃151b﹚20min高压灭菌,另用少量乙醇溶解氯霉素,过滤溶解后加入培养基中,若无氯霉素,使用时每1000ml加链霉素30mg
4、操作步骤
1)样品稀释
与细菌菌落总数测定稀释方法一致。
2)培养
取1:10、1:100、1:1000的检液各1ml分别注入灭菌平皿内,每个稀释各用2个平皿,注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎红培养基,充分摇匀。凝固后,翻转平板,置28℃±1℃培养72h±2h,计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长,为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时,于48h±2h应及时将此平板取出计数。
3)计算方法
先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数,求出每个稀释度的平均菌落。判定结果时,应选取菌落数在5个~50个范围之内的平皿计数,乘以稀释倍数后,即为每g﹙或每ml﹚检样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应参照菌落总数的报告方法报告之。
5.检验结果
每g﹙或每ml﹚化妆品含霉菌和酵母菌数以CFU/g﹙ml﹚表示。
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