细胞培养中使用血清的缺点
血清成分复杂,虽含许多对细胞有利成分,也含有对细胞有害的成分,使血清有几个明显的缺点:
●对大多数细胞,在体内状态,血清不是它们接触的生理学液体,只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态,血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。
●血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。
●取材中可能带入支原体、病毒,对细胞产生潜在影响,可能导致实验失败或实验结果不可靠性。
●动物个体不同,血清产地、批号不同,每批质量差异甚大,其成分不能保持一致。
●血清的使用使得实验和生产的标准化困难,其中的蛋白质使得某些转基因蛋白生物药品生产中分离纯化工作很难完成。
●大规模生产中,血清来源越来越困难,价格昂贵,是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。
血清的质量标准
血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求:
▲牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。
▲有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。
▲证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。
▲血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。
▲无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。
▲对细胞有良好的支持繁殖作用。
血清的质量标准
血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求:
▲牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。
▲有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。
▲证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。
▲血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。
▲无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。
▲对细胞有良好的支持繁殖作用。
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