中国微生物菌种查询网 细菌抗酸染色法（又称耐酸染色法）是检查抗酸细菌(如结核杆菌、麻风杆菌、分支杆菌等)的一种特殊染色法，属于复染色法。细菌抗酸染色的方法很多，常用的是先以浓石炭酸复红加温初染，随即以盐酸酒精或硫酸水脱色，最后用美蓝液复染。
一、抗酸染色液的配制
1、石炭酸品红（复红）染色液
碱性品红：0.3g
95%乙醇：10mL
5%酚水溶液：90mL
将品红溶解于乙醇中，然后与酚溶液混合。
2、3%盐酸-乙醇
浓盐酸：3mL
95%乙醇：97mL
3、吕氏碱性美蓝染色液
美蓝（亚甲基蓝）：0.3g
95%乙醇：30mL
0.01%氢氧化钾溶液：100mL
将美蓝溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。
二、抗酸染色方法
（1）将涂片在火焰上加热固定，滴加较多量的石炭酸品红染色液，在玻片下以酒精灯火焰缓缓加热至有蒸气出现，维持微微发生蒸汽，但切不可使沸腾。染液如因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染液，水洗。
（2）滴加3%盐酸-乙醇脱色，直至无红色脱落为止(所需时间视涂片厚薄而定，一般为1-3min)，充分水洗。
（3）滴加吕氏碱性美蓝染色液，复染约30-60s，水洗。
（4）吸干或烘干，镜检。
三、抗酸染色结果
如属于抗酸细菌，因菌体有抗御酸类脱色的特性，故能保持初染的红色。其他细菌、细胞等物质因无抗酸能力，初染的红色被酸类所脱去，故被复染成蓝色。
多数细菌可用单染法或革兰氏染色法而着色，但有少数细菌，尤其是分枝杆菌属（Mycobacterium）细菌刚需要用抗酸性染色法进行观察。如分枝杆菌属中的结核杆菌（Mycobacterium tuberculosis）和麻疯杆菌（Mycobacterium leprae），用抗酸染色法极具诊断价值。
分枝杆菌与其它细菌不同，其细胞壁含有厚的脂质，染料不易渗透。但一经渗透，也不为酸性酒精脱色，故称之为抗酸性。其它细菌刚易被酸性酒精所脱色，属于非抗酸性。