大肠埃希氏菌生化与鉴定--ATCC菌种
大肠埃希菌是人体不可缺少单细胞生物。大肠埃希菌，俗名大肠杆菌（ 革兰氏阴性短杆菌），周身鞭毛，能运动，无芽。是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠埃希菌的致病物质之一是血浆凝固酶。根据致病性的不同，致泻性大肠埃希菌被分为产肠毒素性大肠埃希菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠集聚性黏附性大肠埃希菌和肠出血性大肠埃希菌5种。
初步生化试验
在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上挑取5 个～10 个典
型或可疑菌落，分别接种TSI 琼脂，同时接种MUG-LST 肉汤，并用已知MUG阳性的大肠埃希氏菌株做对照，于36℃±1℃培养18h～24h。必要时进行氧化酶试验和革兰氏染色。在TSI 琼脂中，典型菌株为斜面与底层均呈黄色，产气或不产气，不产生硫化氢（H2S）。置MUG-LST 肉汤管于长波紫外灯下观察，MUG阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生，大肠埃希氏O157:H7/NM 无荧光；对分解乳糖且无荧光的菌株，在营养琼脂平板上分纯，于36℃±1℃培养18h～24h，并进行下列鉴定。
鉴定
生化试验
用API20E 生化鉴定试剂盒或VITEK-GNI+检测卡，按照生产商提供的使用说明进行。大肠埃希氏菌O157:H7/NM 生化反应特征见表。
血清学试验
在营养琼脂平板上挑取分纯的菌落，用O157:H7 标准血清或O157 乳胶凝集试剂作玻片凝集试验。对于H7 因子血清不凝集者，应穿刺接种半固体琼脂，检查动力，经连续传代3 次，动力试验阴性，H7 因子血清凝集阴性者，确定为无动力株。
生化试验 特征反应
西蒙氏柠檬酸盐 阴性
赖氨酸脱羧酶 阳性（紫色）
鸟氨酸脱羧酶 阳性（紫色）
纤维二糖发酵 阴性
棉子糖发酵 阳性
MUG 试验 阴性（无荧光）
动力试验 有动力或无动力
三糖铁琼脂 底层及斜面呈黄色，H2S 阴性
山梨醇 阴性或迟缓发酵
靛基质 阳性
MR-VP MR 阳性，VP 阴性
氧化酶 阴性
细菌的分离鉴定
1、标本：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。
2、分离培养与鉴定：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。37℃孵育18～24小时后，观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要时检定肠霉毒素。
泌尿系统除确定大肠杆菌外，还应计数，每毫升尿含菌量≥100，000时，才有诊断价值。