ATCC菌种说明书之百日咳鲍特菌Bordetella pertussis百日咳鲍特菌为卵圆形短小杆菌，大小为0.5～1.5×0.2～0.5um，属鲍特氏菌属Bordetella)，无鞭毛、芽胞。革兰氏染色阴性。用甲苯胺蓝染色可见两极异染颗粒。专性需氧，初次分离培养时营养要求较高，需用马铃薯血液甘油琼脂培养基（即鲍～金氏培养基）才能生长。经37℃2～3天培养后，可见细小、圆形、光滑、凸起、银灰色、不透明的菌落，周围有模糊的溶血环。液体培养呈均匀混浊生长，并有少量粘性沉淀。
一、菌种简介
菌种名称：百日咳鲍特菌
培养温度：37°C
培养时间：48 小时
平台编号：bio-67917
其他编号：ATCC 9340
二、培养基：
ATCC Medium: 35 Bordet Gengou Agar
Agar Medium:
Bordet-Gengou Agar Base (BD 248200)…………………….30.0 g
Glycerol………………………………………………….………10.0 ml
Proteose Peptone……………………………………….……..10.0 g
DI Water…………………………………………………………840 ml
Adjust for pH 6.7 +/- 0.2. Autoclave at 121? C. Cool base medium to 45-50?C and add:
Sterile Defibrinated Rabbit Blood…………….……………….150 ml
三、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存
注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种
在 1-2 个斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足
而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；
2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
4）应根据菌种状况及时转接；冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；
5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和中国微生物菌种查询网
联系。
单层冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3
滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口
处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并
抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用
牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成
复苏不成功；
3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养
时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；
百日咳鲍特菌生物学性状
百日咳鲍特菌生化反应弱，一般不发酵糖类，但分解蔗糖和乳糖，产酸不产气，不产生H2S和吲哚，过氧化氢酶试验阳性。本菌常发生光滑型到粗糙的相变异：Ⅰ相为光滑型，菌落光滑，有荚膜，毒力强；Ⅳ相为粗糙型，菌落粗糙，无荚膜，无毒力。Ⅱ、Ⅲ相为过渡相。一般在疾病急性期分离的细菌为Ⅰ相，疾病晚期和多次传代培养可出现Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ相的变异。发生这种变异时，细菌形态、菌落、溶血性、抗原结构和致病力等均出现变异。
百日咳杆菌含有耐热的菌体（O）抗原和不耐热的荚膜（K）抗原。前者为鲍特氏菌属共同抗原，后者仅存于百日咳杆菌。
本菌抵抗力弱。56℃30分钟、日光照射1小时可致死亡。对多粘菌素、氯霉素、红霉素、氨苄青霉素等敏感，对青霉素不敏感。