枯草芽孢杆菌的自然转化模式和特点 !
中国微生物菌种查询网 / 2018-08-22 14:56:34

        欢迎访问中国微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!
一、枯草芽孢杆菌的自然转化模式 
1、  细菌生长在一定的培养条件下生长到一定阶段,以枯草芽孢杆菌为例是在葡萄糖基本培养基中培养到对数生长末期到稳定期,细胞向胞外分泌一种小分子的蛋白质,称为感受态因子,其分子量为 5000到 10000道尔顿。 
2、  当培养液中的感受态因子积累到一定浓度后,与细胞表面受体相互作用,通过一系列信号传递系统诱导一些感受态一特异蛋白质(competence  specific  protein)表达,其中一种是自溶素(autolysin),它的表达使细胞表面的  DNA 结合蛋白及核酸酶裸露出来,使其具有与 DNA 结合的活性。 
3、DNA 以双链形式在细胞表面的几个位点上结合并遭到核酸酶的切割,核酸内切酶首先切断 DNA 双链中的一条链,被切断的链遭到核酸酶降解,成为寡核苷酸释放到培养基中,另一条链与感受态一特异蛋白质结合,并被引导进入细胞, 
4、  进入细胞的外源 DNA 通过同源重组以置换的方式整合进受体染色体 DNA,经复制和细胞分裂后形成重组体。
二、枯草芽孢杆菌的自然转化特点 
1、 枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性菌细胞对双链 DNA 的吸附和摄取是没有特异性的,转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化给体菌株和转化受体菌株之间的亲源关系,关系越近,则 DNA 之间的同源性也越高,就越容易在 DNA 之间发生重组,产生转化子。 
2、自然感受态除了对线型染色体 DNA分子的摄取外,也能摄取质粒 DNA,但在通常情况下质粒的自然转化效率要低得多,  这是因为质粒作为细菌染色体外独立存在的遗传物质和染色体 DNA同源性很差(否则会因为和染色体 DNA之间的重组而不稳定) ,这样被切割成单链后进入细胞的质粒  DNA 将很难通过重组重新恢复成有活性的状态(双链闭合环状) ,或通过整合进染色体而使相关性状得到表达;如要提高质粒的自然转化效率,可以用二种方法:i)使质粒形成多聚体,这样进入细胞后重新组合成有活性的质粒的几率大大提高;ii)在质粒上插入受体菌染色体的部分片段,或将质粒转化进含有与该质粒具有同源区段的质粒的受体菌重组获救。 
3、 噬菌体 DNA 也可被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒,这个过程被称为转染(transfection),其特点是提纯的噬菌体 DNA以转化的(而非病毒感染)途径进入细胞并表达后产生完整的病毒颗粒。 现在把 DNA转移至动物细胞的过程也称转染。 

  • 上一篇:减少微生物对食品污染的6大保藏方法!
  • 下一篇:大肠杆菌生长曲线的测定方法