ATCC 11859 巴氏芽孢杆菌
培养温度：30℃
培养时间 ：18-24 小时
一、培养基： CASO AGAR+20g/L 尿素
酪蛋白胨 15g
大豆蛋白胨 5g
氯化钠 5g
蒸馏水 1L
琼脂1L
PH7.3
二、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。
三、注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 2 支斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；
2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；
5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和中国微生物菌种查询网联系。
四、单层冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3 滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口 处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是 用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造 成复苏不成功；
3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成； 有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说，菌种稳定后才能用于您的后续实验。
4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。
5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。
6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
五、传播程序
1.使用单管＃1376肉汤（5至6 mL），用巴斯德或1.0 mL移液管取出约0.5至1.0 mL。 将整个颗粒再水化。
2.将此等分试样转移回肉汤管中。 好好混合。
3.将1.0mL悬浮液转移至第二管发酵液中。 如果需要，从第二管中使用几滴接种斜面和/或板。 用于冷冻＃干燥程序的冷冻保护剂可以抑制初级管中的生长，因此需要立即转移。
4.将所有管和板在30℃下孵育48至72小时。 如果在琼脂培养基上生长不重，此时从培养的培养液中进行额外的转移。