细胞系包裹收到后，请按下列方法操作。
①培养基：complete growth medium: RPMI 1640, 90%; fetal bovine serum, 10% ,Temperature: 37.0C
②。如果接种小鼠腹腔，细胞浓度大于2-5 X 107
③瓶内含5%FBS，请补加至10%FBS
一．贴壁细胞
1．严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
2．将细胞培养瓶内50ml培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（此培养基可再用）。
3．加入消化液1～1.5ml，37℃消化直到细胞脱落。
4．换新的细胞培养瓶，加入步骤2的培养基8ml，再在37℃，5％CO2下培养。
二．悬浮细胞
1．严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
2．将细胞培养瓶内50ml培养基用吸管移到离心管中。（严禁直接倾倒）
3．在1000rpm，10min离心。
4．将上清吸到另一无菌容器中，（此培养基可再用）。
5．对沉淀用步骤4的培养基再悬浮。
6．换新的细胞培养瓶，加入细胞培养瓶，在37℃，5％CO2下培养。
三．半贴壁细胞
1．参照上述1、2操作。
四．二毫升小管操作方法 小管内也是此细胞。
1．此管内细胞浓度在1-5 X 105个，将24孔克隆板的一排6孔每孔内加1毫升培养基；
2．将小管无菌开启，细胞吸入第1孔内，倍比稀释至2孔，再倍比稀释至3孔，最后至6孔；
3．在37℃，5％CO2下培养，1周内应有某孔至细胞生长至对数生长期，取出细胞至T-25细胞培养瓶，常规培养。
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