细胞名称 草鱼肾细胞;GIK
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 GIK的克隆系。
培养条件 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C18
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
1)提供的是处理生长状态的细胞,千万不能放置冰箱,如果短时间,可放置室温,最好放置25度培养箱。
2)提供的细胞,置T25细胞培养瓶内,瓶外用塑料袋包装,塑料袋内应无液体渗漏。
3)贴壁生长的满瓶细胞培养基对着灯光看应是透明的。如果是悬浮细胞,除悬浮成团细胞外,培养基对着灯光看也应是透明的,半贴壁细胞除成块脱落细胞外,培养基也应是透明的。如果培养基存在混浊,变黄,则应存在微生物污染。
4)细胞的初步观察可直接在满培养基时显微镜下进行,
5)要求用吸管慢慢吸出培养基,严禁直接倾倒。要求换新瓶培养细胞
6)因运输途中细胞处于非正常条件,部分细胞会死亡,换瓶细胞是最好1:1,以保证细胞处于合适的密度中,满足细胞生长时的密度依赖性。7)如果同时寄2瓶相同细胞,建议在收到细胞后,先按要求操作一瓶,另一瓶细胞第二天操作,避免系统性污染风险。
8)每株细胞都有操作要求,请严格按操作要求提供细胞生长所需的培养基,生长条件,特别是首次传代方法。
正确的接收处理细胞是细胞培养成功的关键,如果在接收中还存在任何疑问,请向有细胞培养经验的老师请教或直接与我们联系,在完全消除疑惑后再按指导的正确方法操作。
①培养基:complete growth medium: Minimum essential medium (Eagle) with 2 mM L-glutamine and Earle's BSS adjusted to contain 1.5 g/L sodium bicarbonate, 0.1 mM non-essential amino acids, and 1.0 mM sodium pyruvate, 90%; fetal bovine serum, 10% ,Temperature: 25-28C,5%CO2,如果没有CO2培养箱,请在培养基中加入HEPPS,每升5克。,
②。瓶内含5%FBS,请补加至10%FBS
贴壁细胞
1. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
2. 将细胞培养瓶内50ml培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(此培养基可再用)。
3. 加入消化液1~1.5ml,37℃消化直到细胞脱落。
4. 换新的细胞培养瓶,加入步骤2的培养基8ml,再在25℃,5%CO2下培养。