细胞冻存方法与复苏
中国微生物菌种查询网 / 2013-05-13 05:40:28

   细胞冻存方法与复苏中国微生物菌种查询网为您解答:


 一)细胞冻存方法

将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。

二)冻存细胞的复苏

应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37~37.5℃,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。

1000g离心5min,弃上清,加入1ml新鲜完全培养基重悬细胞。

在无菌台内取适量完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。


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