肠道菌增菌液体培养基的性质与实验方法及结果判读要点!
小杨 / 2026-03-03 09:44:08
肠道菌增菌液体培养基是一种选择性增菌培养基,核心原理是通过营养支持 + 选择性抑制 + pH 指示,富集肠杆菌科细菌并抑制杂菌;实验现象主要通过培养基浑浊度、颜色变化、产气情况判断目标菌生长。
一、核心原理
1、营养与缓冲体系(基础保障)
明胶胰酶水解物/蛋白胨:提供氮源、氨基酸、维生素,满足细菌生长基本需求。
葡萄糖:作为可发酵碳源,供目标菌代谢利用。
磷酸氢二钠 + 磷酸二氢钾:组成缓冲对,稳定 pH 在 7.2±0.2,避免代谢产物剧烈改变 pH。
2、选择性抑制(筛选核心)
牛胆盐:抑制绝大多数革兰氏阳性菌(如
葡萄球菌、
链球菌)及部分非肠道革兰氏阴性菌。
亮绿(煌绿):双重作用 ——①强化抑制革兰氏阳性菌;②作为酸碱指示剂,酸性变黄、碱性/中性呈绿色。
3、鉴别机制(结果判断)
肠道菌(如
大肠埃希菌、
沙门氏菌)耐受胆盐与亮绿,可发酵葡萄糖产酸,使亮绿由绿变黄;部分菌产气,液面出现气泡。
二、典型实验现象(36±1℃培养 18–24h)
1、目标菌(肠杆菌科)生长现象
培养基均匀浑浊(细菌大量繁殖)
颜色由绿色→黄色/黄绿色(产酸)
液面/试管壁大量气泡(产气)
志贺氏菌:
培养基浑浊、变黄(产酸)
不产气(无气泡)
2、非目标菌/杂菌现象
培养基清澈、无浑浊(被完全抑制)
颜色保持绿色、无气泡
铜绿假单胞菌:
仅在液面表层生长、形成薄菌膜
培养基仍为绿色、无气泡、无明显浑浊(产酸弱、不发酵葡萄糖)
阴性对照(无菌):
清澈透明、绿色不变、无气泡
三、结果判读要点
阳性(有目标菌):浑浊 + 变黄 ± 产气 → 需转种鉴别培养基进一步鉴定。
阴性(无目标菌):清澈/微浑、绿色、无气泡 → 可报告未检出肠杆菌科细菌。
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