蜡样芽胞杆菌选择性琼脂基础的原理与使用方法及注意事项！
小杨 / 2026-01-14 09:32:08
一、培养基原理
该培养基的选择性和鉴别性由基础成分、选择性试剂、鉴别性底物共同实现，核心原理如下：
1、选择性抑制机制
培养基中添加 多粘菌素 B 或 多粘菌素 E，这类抗生素能作用于革兰氏阴性菌的细胞膜，破坏其结构完整性，从而抑制绝大多数革兰氏阴性杂菌的生长；而
蜡样芽胞杆菌作为革兰氏阳性菌，对多粘菌素具有抗性，可在培养基上正常生长。
2、鉴别性底物反应
甘露醇（碳源）：
蜡样芽胞杆菌不发酵甘露醇，其菌落周围不会产生酸性物质；而其他能发酵甘露醇的杂菌（如
葡萄球菌）会使培养基中的酸碱指示剂变色。
卵黄（卵磷脂底物）：
蜡样芽胞杆菌可产生卵磷脂酶，该酶能分解卵黄中的卵磷脂，生成不溶性的甘油酯和脂肪酸，在菌落周围形成特征性的沉淀环。
酸碱指示剂（酚红）：酚红的变色范围为 pH 6.8（黄）~ 8.4（红）。不发酵甘露醇的菌株，菌落周围培养基保持中性或弱碱性，呈红色；发酵甘露醇的菌株会产酸，使菌落周围培养基变为黄色。
二、实验现象
将待检样品（如食品匀浆稀释液）接种于 MYP 琼脂平板，经 30℃ ± 1℃ 培养 24 h ~ 48 h 后，观察菌落形态及周围培养基变化，典型实验现象如下：
1、蜡样芽胞杆菌的典型菌落
菌落形态：呈乳白色至淡粉红色，不透明，表面粗糙，边缘不整齐，类似毛玻璃或蜡状，直径约 2 mm ~ 5 mm。
特征性沉淀环：菌落周围会出现一圈 宽约 2 mm ~ 5 mm 的乳白色浑浊环（卵磷脂酶分解卵黄的产物），此为蜡样芽胞杆菌的关键鉴别特征。
培养基颜色：菌落周围的培养基无黄色变化，保持酚红的红色（因不发酵甘露醇）。
2、杂菌的菌落现象
革兰氏阴性菌：因受多粘菌素抑制，无法生长或仅形成微小菌落。
可发酵甘露醇的革兰氏阳性杂菌（如
葡萄球菌）：菌落周围培养基变为黄色，且多数不产生卵磷脂酶，无乳白色浑浊环。
不发酵甘露醇但无卵磷脂酶的杂菌：菌落周围培养基为红色，但无浑浊环，可与蜡样芽胞杆菌区分。
三、注意事项
卵黄液需临用前添加，且避免高温灭菌，以防破坏卵磷脂成分；多粘菌素需用无菌水溶解后，在培养基冷却至 50℃ 左右时加入。
培养时间需严格控制在 24 h ~ 48 h，超过 48 h 可能导致杂菌过度生长，干扰结果判断。
仅通过 MYP 琼脂的菌落形态无法完全确证
蜡样芽胞杆菌，需进一步结合生化试验或分子生物学方法进行鉴定。
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