副溶血性弧菌的培养特性与操作要点及应用与质控提示!
小杨 / 2026-01-05 09:49:33

 

副溶血性弧菌是革兰氏阴性嗜盐弧菌,兼性厌氧,营养要求不高,核心培养特性为嗜盐(无盐不生长)、最适 37℃与 pH 7.4-8.0、在 TCBS 呈绿色菌落,以下是详细要点。
 
一、核心生长条件
 
参数         范围      最适      备注
 
NaCl 浓度  0.5%–10%  3%–3.5%(30–35 g/L)  无盐不生长,>10% 抑制生长
 
温度  8℃–44℃  37℃  4℃不生长,5℃–10℃可存活
 
pH  7.0–9.5  7.4–8.0  <5.0 不生长,耐碱不耐酸
 
氧气  需氧为主,兼性厌氧  有氧  厌氧下生长缓慢,液体表面易形成菌膜
 
水分活度(aw)  ≥0.948  –  <0.948 不生长
 
二、液体培养表现
 
含 3% NaCl 肉汤:37℃培养 18–24 h,多为均匀混浊,表面形成菌膜;R 型菌株可见沉淀;动力强,单鞭毛,呈“鱼群样”运动。
 
硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖(TCBS)增菌液:混浊生长,表面菌膜明显,非选择性增菌常用。
 
三、固体培养基菌落特征
 
TCBS 琼脂(选择性 + 鉴别):圆形、半透明、光滑湿润,直径 2–3 mm,绿色(不发酵蔗糖),质感似口香糖,为典型菌落形态。
 
3.5% NaCl 琼脂:隆起、光滑湿润、不透明,边缘可蔓延不整齐,无色素。
 
羊血琼脂:2–3 mm 圆形、灰白色、湿润隆起,部分菌株呈 β 溶血或 α 溶血。
 
SS 琼脂:多不生长,少数为 1–2 mm 扁平无色半透明,不易挑起、呈粘丝状。
 
氯化钠蔗糖琼脂:绿色菌落(不发酵蔗糖),用于与发酵蔗糖的弧菌区分。
 
四、培养操作要点
 
培养基需添加 3% NaCl,避免无盐或高盐(>10%)抑制。
 
增菌用 3% NaCl 碱性蛋白胨水(pH 8.0–8.5),37℃ 6–8 h 后转种 TCBS。
 
分离平板 37℃ 18–24 h 观察,TCBS 绿色菌落优先纯化鉴定。
 
厌氧培养需延长至 48 h 以上,且生长较弱,不推荐常规使用。
 
质控提示:标准菌株(如 ATCC 17802)在 TCBS 应呈绿色菌落,无盐平板不生长,氧化酶阳性,以验证培养基与条件有效性。
 
五、应用与质控提示
 
食品检测:优先用 TCBS 筛选绿色菌落,结合生化(氧化酶 +、赖氨酸脱羧酶 +、不发酵蔗糖)与血清分型确认。
 
临床分离:注意血琼脂溶血株与非溶血株的致病性差异。
 
实验室质控:每批培养基做阳性(ATCC 17802)与阴性(如大肠杆菌)对照,确保选择性与鉴别性有效。
 
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