霍乱双糖铁琼脂（CTIA）实验原理与现象及结果判定！
小杨 / 2026-01-04 09:53:04
霍乱双糖铁琼脂（Cholera Triple Sugar Iron Agar，CTIA）是用于霍乱弧菌筛选和初步鉴定的选择性培养基，其核心设计基于霍乱弧菌的碳源利用特性和产碱/产酸代谢特点。
一、实验原理
碳源组成培养基中含有两种糖类：葡萄糖（低浓度，0.1%）和蔗糖（高浓度，1%），同时含有蛋白胨作为氮源。霍乱弧菌可发酵蔗糖，但部分非致病性弧菌可能仅发酵葡萄糖或不发酵蔗糖，以此实现鉴别。
pH 指示剂培养基中加入酚红作为 pH 指示剂，其变色范围为 pH 6.8（黄）~ pH 8.4（红）。
细菌发酵糖类产酸时，培养基 pH 下降，酚红由红色变为黄色；
细菌分解蛋白胨产碱时，培养基 pH 上升，酚红保持红色或变为更深的红色。
硫代硫酸钠与柠檬酸铁铵培养基中添加硫代硫酸钠（底物）和柠檬酸铁铵（指示剂），用于检测细菌是否产生硫化氢（H₂S）：细菌产生的 H₂S 与柠檬酸铁铵中的 Fe³⁺结合，生成黑色的硫化亚铁沉淀。
选择性抑制剂部分 CTIA 配方中会加入亚碲酸钾等抑制剂，可抑制革兰氏阳性菌和部分非致病性革兰氏阴性菌，提高霍乱弧菌的检出率。
二、典型实验现象及结果判定
实验方法为：用接种针挑取纯培养的菌落，穿刺接种到 CTIA 培养基深层，同时在培养基斜面划线，37℃培养 18~24h 后观察结果。
菌株类型 斜面颜色 底层颜色 硫化氢（H₂S） 产气情况 典型代表菌株
霍乱弧菌 黄色 黄色 阴性（无黑色） 阳性（有气泡/裂隙） O1 群、O139 群霍乱弧菌
非发酵蔗糖弧菌 红色 黄色 阴性 阴性或弱阳性 部分副溶血弧菌
产硫化氢菌株 红色/黄色 黄色 阳性（黑色沉淀） 不定 沙门氏菌属
关键现象解读
霍乱弧菌的特征表现因霍乱弧菌可同时发酵葡萄糖和蔗糖，产酸量多，因此斜面和底层均呈黄色；代谢过程中产生气体，培养基底层或斜面可见气泡、裂隙；霍乱弧菌不产生硫化氢，培养基无黑色沉淀。
非目标菌株的区分
仅发酵葡萄糖的菌株：葡萄糖耗尽后，细菌在斜面分解蛋白胨产碱，使斜面变红，底层因葡萄糖发酵产酸保持黄色（即红斜面、黄底层）。
产硫化氢菌株：培养基内出现黑色沉淀，可直接与霍乱弧菌区分。
三、注意事项
接种时需保证穿刺到底部，且斜面划线均匀，避免因接种操作不当导致结果误判。
培养时间不宜超过 24h，否则斜面易因蛋白胨过度分解而变为红色，干扰结果判定。
CTIA 仅为初步鉴定培养基，最终确诊霍乱弧菌需结合血清学试验、生化试验及分子生物学方法。
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在
微生物菌种查询网中获得最优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！
下载附件
上一篇：蜡样芽胞杆菌溶血试验与溶菌酶耐性试验的操作步骤！
下一篇：生物实验室日常工作中微生物菌种销毁的规范流程与方法！