假单胞菌荧光色素培养基配方与培养方法及注意事项！
小杨 / 2025-05-06 09:40:58
假单胞菌（如
铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 和
荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens）产荧光色素的特性与其代谢产物（如绿脓菌素 pyocyanin 和荧光素 pyoverdine）密切相关。以下是为促进这类荧光色素产生而设计的常用培养基及培养方法：
1、King's A 和 King's B 培养基
这两种培养基广泛用于
假单胞菌的荧光色素检测和代谢研究：
(1) King's A 培养基
用途：促进 绿脓菌素（pyocyanin） 的产生（
铜绿假单胞菌特有）。
配方（1L）：
蛋白胨（Proteose peptone）：20 g
甘油（Glycerol）：10 mL
无水硫酸镁（MgSO₄）：1.5 g
磷酸氢二钾（K₂HPO₄）：1.5 g
琼脂（可选）：15 g（固体培养基）
pH：7.2 ± 0.2
(2) King's B 培养基
用途：促进 荧光素（pyoverdine） 的产生（多种假单胞菌均产）。
配方（1L）：
蛋白胨（Proteose peptone）：20 g
甘油（Glycerol）：10 mL
无水硫酸镁（MgSO₄）：1.5 g
磷酸氢二钾（K₂HPO₄）：1.5 g
琼脂（可选）：15 g（固体培养基）
pH：7.2 ± 0.2
2、培养方法
培养条件：
时间：24–48小时（荧光色素通常在18–24小时后可见）。
观察方法：
在长波紫外线下观察菌落或液体培养物，荧光素会发出蓝绿色荧光。
绿脓菌素（pyocyanin）为蓝绿色色素，在可见光下可直接观察。
3、其他可选培养基
假单胞菌分离琼脂（Pseudomonas Isolation Agar, PIA）：
含 Irgasan（三氯生），选择性抑制其他细菌，促进假单胞菌生长。
胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）或肉汤（TSB）：
通用培养基，假单胞菌可生长并产荧光，但色素产量可能较低。
4、荧光色素的鉴别
同时产 pyocyanin（蓝绿色） 和 pyoverdine（黄绿色荧光）。
主要产 pyoverdine，无绿脓菌素。
5、注意事项
紫外线防护：观察荧光时需佩戴防紫外线护目镜。
铁限制条件：低铁环境（如 King's B 培养基）可增强荧光素（pyoverdine）的合成。
商业化试剂：部分公司提供预制的假单胞菌选择性培养基。
通过上述培养基和培养条件，可有效诱导
假单胞菌产荧光色素，用于菌种鉴定或次级代谢产物的研究。
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