营养肉汤NB的制备和使用方法及安全操作规范!
小杨 / 2024-05-15 09:13:47

 

一、背景
 
营养肉汤(NB)也被称为营养肉汤培养基或Nutrient Broth,是一种常用的细菌培养基,用于细菌的传代、培养、转种、复壮和增菌等。
 
营养肉汤(NB)的主要成分包括蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化钠。其中,蛋白胨和牛肉浸粉为微生物生长提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠则用于维持培养基的渗透压。
 
在制备营养肉汤(NB)时,需要将适量的培养基粉末溶解在蒸馏水中,并加热溶解。然后,将溶液分装到三角瓶或试管中,进行高压灭菌处理,备用。
 
营养肉汤(NB)适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。它广泛用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测,以及其他需要一般细菌培养的实验中。
 
营养肉汤(NB)混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。这种培养基广泛用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。
 
二、营养肉汤的制备和使用需要遵循以下安全操作规范:
 
1、穿戴防护设备:在制备过程中,应穿戴实验服、护目镜、手套等防护设备,以防止培养基飞溅到皮肤或眼睛中。
 
2、确保实验环境清洁:实验环境应保持清洁,以减少微生物污染的可能性。
 
3、无菌操作:制备营养肉汤时应确保所有使用的工具、容器和试剂都是无菌的。避免用手直接接触培养基。
 
4、高压灭菌:制备好的营养肉汤应经过高压灭菌处理,以杀死可能存在的细菌和其他微生物。
 
5、储存条件:灭菌后的营养肉汤应储存在适当的条件下,通常是在冷藏环境中。确保在有效期内使用。
 
6、避免交叉污染:在使用营养肉汤时,应避免与其他实验材料或试剂发生交叉污染。例如,不要使用同一支移液管在不同类型的培养基之间转移液体。
 
7、处理废弃物:使用后的培养基废弃物应按照实验室废弃物处理规定进行妥善处理。
 
8、遵守实验室规章制度:在制备和使用营养肉汤时,应严格遵守实验室的规章制度和安全操作规范。
 
三、应用
 
营养肉汤(NB)可以用于抗菌塑料砧板抗菌性能的评价方法优化及其应用研究:
 
选择常见的食品接触材料制品“抗菌塑料砧板”为研究对象,主要探讨了其抗菌性和抗菌耐久性相关的评价技术与方法,在此基础上对市场上销售的抗菌塑料砧板进行了合格率调查,相关结果总结如下:
 
1、首先针对食品接触材料抗菌性能贴膜法(GB/T 31402-2015)中接种液在阴性对照和空白对照培养24 h后菌落回收出现明显增殖这一现象,研究了接种液中营养肉汤浓度对贴膜法菌落回收的影响。结果显示,试验菌种为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌时,菌液制备用营养肉汤(NB)的最佳浓度比分别为1/500和1/1000,相比原国标法大肠杆菌的接种液浓度为1/500营养肉汤(1/500NB),本实验改进的方法更能保障测试结果的准确。
 
2、分别采用原国标法及本实验改进的国标法对20种抗菌塑料砧板进行抗菌性能评价,验证改进方法的有效性。营养肉汤(NB)结果显示,13种抗菌塑料砧对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有抗菌作用,抗菌率都>90%,其余7种抗菌率<90%为不合格产品,合格率仅为65%,这说明市售抗菌塑料砧板的抗菌合格率总体偏低,应进一步加强管理,引导抗菌塑料砧板产业加强技术研发,提高抗菌效果。营养肉汤(NB)数据表明抗菌效果与砧板银离子浓度相关,要实现90%以上抗菌率,银离子最低浓度基本要达到25 mg/Kg以上,而当银离子最低浓度>40 mg/Kg时,抗菌率均高于99.99%。此外,数据显示相对于国标法,改进的方法更严格、准确,20种受试砧板对大肠杆菌的抗菌合格率为70%,而国标法对大肠杆菌的抗菌合格率为80%。
 
3、对市售的两种纳米银抗菌塑料砧板用改进的国标法进行抗菌性能评价,结果表明,两种纳米银抗菌塑料砧板对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都具有抗菌效果,抗菌性能值都>3.00,但较低湿度下大部分的细菌会干燥死亡。当使用正常浓度的营养肉汤(NB)制备的菌悬液用于测试时,纳米银抗菌塑料砧板表现出弱的甚至无抗菌作用。表皮葡萄球菌,沙门氏菌,沙雷氏菌和单核细胞增生李斯特菌等4种食源细菌接种实验结果表明,纳米银抗菌塑料砧板在正常浓度NB和高湿度下抗菌效果并不理想。与实际的食物使用情况相比,标准贴膜试验可能会高估纳米银抗菌塑料砧板的抗菌效果。
 
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得最优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!
 
  • 下载附件
  • 上一篇:清酒广泛乳杆菌清酒亚种:培养基质控和分类学研究
  • 下一篇:MTEC小鼠肾小管上皮细胞的培养步骤及验收注意事项!