敏捷食酸菌的实验内容与保藏方法!
小杨 / 2021-05-08 08:42:16


敏捷食酸菌是Acidovorax属的微生物,原产地为中国。菌落圆形,扁平,浅黄色,不透明,表面光滑,边缘整齐规则。耐受重金属 Cd。主要用途为研究;教学,具体用途为分类、研究,具有用作耐重金属基因资源潜力。 

一、菌种简介
平台编号:bio-53230
规格:冻干物
拉丁属名:Acidovorax facilis,72W
中文名:敏捷食酸菌 
属:Acidovorax 
原产地:中国 
模式菌株:非模式菌株
其它编号:ATCC55746
培养基编号:164
培养温度:30
培养时间:18-24 小时
用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
保藏条件:斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。

二、培养基
*营养琼脂培养基(NA)
*胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSA)
*LB 培养基(以上三种任选一种即可)

三、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

四、保藏方法
1、传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3、载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5、冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

五、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 个斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。

  • 上一篇:新生隐球菌的微生物学检查与注意事项!
  • 下一篇:金龟子绿僵菌的作用与应用及注意事项!