金龟子绿僵菌的作用与应用及注意事项！
小杨 / 2021-05-08 08:53:35
金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae属于子囊菌门、肉座菌目、麦角菌科、绿僵菌属，是一种广谱性的杀虫真菌。在自然界中主要进行无性繁殖，由昆虫体壁进行主动入侵而感染不同昆虫，在昆虫血腔中可进行酵母状繁殖，产生大量虫菌体，同时可产生破坏素(destuxin，非核糖体多肽类毒素）等杀虫毒素，抑制昆虫免疫、加速杀虫。在昆虫寄主不存在时，金龟子绿僵菌还可与植物根部形成根际共生关系而进行长期宿存。
一、菌种简介
平台编号：bio-67986
拉丁属名：Metarhizium anisopliae
中文名：金龟子绿僵菌
外文名：Metarhizium anisopliae
属：麦菌科、绿僵菌属
地位：广谱性的杀虫真菌
生殖：主要进行无性繁殖
作用：抑制昆虫免疫、加速杀虫
培养基编号：14
培养温度：24-28
培养时间：5-7 天
用途：研究
培养基信息
培养基编号：14
名称：Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂)
可用于培养菌种：适用范围：酵米面假单胞菌（酵米面黄杆菌）、白色链霉菌、烬灰链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、灰色链
备注：[Note]: Potato extract: Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃ for 20 minutes.（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。）
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
二、培养基
综合马铃薯培养基（PDA）
20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然
20%马铃薯汁配制方法：马铃薯洗净去皮，取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块，将滤液补足 1000ml。
三、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。
四、作用
它对寄主侵染过程包括粘附、孢子萌发、产生附着胞、穿透虫体、体内发育和致死。这一过程是附着胞、表皮降解酶和破坏菌素等物质的生理生化作用的综合结果。由于其寄主范围广、致病力强，对人、畜、农作物无害，容易进行大规模生产，以及能够产生持续控制效果等，具有广阔的害虫生物防治应用前景。
五、应用
金龟子绿僵菌可制作真菌杀虫剂，但相对于化学杀虫剂，真菌杀虫剂的杀虫速率缓慢，理想条件下需要3-7天，而杀虫效率容易受环境条件的影响，如温度、湿度及紫外线照射影响等。为了提高真菌杀虫剂的应用效率，科学家通过遗传改造，可显著提高金龟子绿僵菌的杀虫速度。
六、注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，参照“开管说明”，用无菌吸管吸取0.3-0.5ml 培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或斜面）；
2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；
3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；
6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和中国微生物菌种查询网联系。
7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理；
8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。