红霉素链霉菌的外形与属性及培养与保存方法!
小杨 / 2023-07-18 08:50:56


红霉素链霉菌是具有菌丝及孢子分化的革兰氏阳性菌 G(+),会产生由表面多刺的孢子组成的短孢子链。产生孢子的方式是由营养气生菌丝末端开始卷曲,然后菌丝会产生隔膜,将菌丝分为几段,接着逐渐加厚隔膜成壁,最后形成圆圆的孢子释放。

一、菌种简介
平台编号:Bio-51860
规格:冻干物
拉丁属名:Streptomyces Erythreus (Waksman Et Curtis) Waksman Et Henrici
菌株名称:红霉素链霉菌
分类:--细菌--放线菌
外形:孢子球形、卵圆形,表面光滑
基丝:微黄色,后变红色。
其他编号:AS4.894
培养基编号:27,46
培养温度:28℃
用途:产红霉素
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、菌株外形
孢子丝松敞和紧密螺旋形(ISP孢子丝短、钩状、圈环至初旋)。

三、菌株属性
蔗糖硝酸盐琼脂:气丝厚,白色至淡粉色。无可溶色素。葡糖天冬素琼脂:基丝好,乳脂色,表面转褐色。淀粉琼脂:基丝乳脂色,略带微绿色彩。甘油天冬素琼脂(ISP)、无机盐淀粉琼脂(ISP)、酵母精麦芽精琼脂(ISP)、燕麦粉琼脂(ISP):气丝灰黄粉色、淡橙黄色。基丝反面在第一种培养基上黄褐色至强褐色,在第三种培养基上褐色至灰红褐色,在其余两种培养基上橙黄色至浅黄褐色或灰黄色。反面色素一般对pH不敏感,但如有粉色素,加0.05N HCl,可能变为淡黄色。可能有粉色或黄色可溶色素,如有粉色素,加0.05N HCl或NaOH变为无色。营养琼脂:基丝乳脂色。无可溶色素。马铃薯块:基丝乳脂色,变为微黄色至红色至微绛红色。明胶缓慢液化。牛奶凝固有限并胨化。淀粉水解。纤维素上生长砖红色。硝酸盐在以淀粉为碳源时还原。不产生类黑色素、酪氨酸酶和H2S。生长适温25℃。利用D—葡萄糖、D—果糖、蔗糖、棉子精、D—甘露醇;对L—阿拉伯糖、D—木糖、鼠李糖、肌醇的利用报道分歧。

四、菌种培养
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一种)、原种(二种)和栽培种(三种)三。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备(见图)菌种制备 ,其中(1)~(4)为孢子制备过程。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28~37℃培养5~14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐(6)的种子。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶(5)液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

五、保存方法
1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
3、悬液保存法:
①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
4、载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
5、常用的冷冻保存法:
①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法(-196℃):是适用范围广的微生物保存法。

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