苏云金杆菌的部分生化试验鉴定!
小杨 / 2019-12-31 09:19:03


一、目的要求: 

本实验是通过简单的生化测定来了解苏云金杆菌的生化鉴定技术。 

鉴定苏云金杆菌的生化指标是:V、P反应,卵磷脂酶,蛋白水解,吐温酶,水杨素,七叶灵、蔗糖、甘露糖、表膜、酶、淀粉、几丁质酶、精氨酸脱羟酶等。

二、实验材料: 

1、天平 
2、电炉 
3、药勺
4、量筒
5、烧杯
6、pH试纸
7、高压锅(手提式)
8、接种环 

三、实验内容: 

1、糖利用: 
蛋白胨                                     1% 
琼脂                                        2% 
蔗糖(甘露糖)                         1%(水杨素为0.5%) 
1%酸性复红水溶液                     0.5% 
蛋白胨加热溶于水中,加入酸性复红水溶液。分别加入一种糖加热溶解,以不加糖的蛋白胨作对照。分装试管,调pH至7.58磅灭菌30分钟。 
接种后于30℃恒温培养检查产酸情况,若培养基变红者为正反应。 

2、七叶灵利用: 
牛肉膏                                1% 
七叶灵                                0.5% 
琼脂                                  2% 
另配5%三氯化铁水溶液单独灭菌。培养基溶后,先将三氯化铁每皿滴入2滴,后倒平板混匀。凝固后电接菌种,30 ℃培养3-5天。菌苔周围出现深褐色区为阳性反应。 

3、V、P反应: 
蛋白胨5克  葡萄糖5克  NaCl 5克  蒸馏水 1000毫升 
分装试管   8磅30分钟灭菌 
接菌后于37 ℃培养24小时,每管加入4%KOH溶液10-20滴,再加等量的5%的一萘酚乙醇水溶液后,用力振荡。然后置37 ℃下保温0.5小时。培养物出现红色即为V、P正反应,并设未接种的试管为对照。
 
4、淀粉水解试验: 
牛肉膏 5克  NaCl 5克  可熔性淀粉 5克  琼脂  10克  蒸馏水 1000毫升  
将试验菌点种于平板上,徒长出菌落后,收Lugoc氏碘液倾注于平板表面,菌落四周有透明圈者为阳性放应。

5、菌膜形成试验: 
肉汤试管接种,30。C静止培养24小时后观察菌膜形成情况及摇动后膜破粹情况。

6、卵磷脂酶试验 
蛋白胨1%   酵母膏  0.3%  NaCl  0.5%  琼脂 2%  卵黄2-3%  pH 7-7.2 
用75%酒精将新鲜鸡蛋进行表面消毒,并用经火焰灭菌的镊子将蛋两端各打一个孔,倾去蛋清,然后用无菌5ml吸管取出卵黄,加至触化后冷却至50。C左右的培养基中,使卵黄含量为培养基总体积的2~3%。混匀后倒平板,点接菌种24小时后观察,菌液边缘出现混浊圈者表示卵鳞酯酶为阳性。

北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得最优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!


  • 上一篇:pGR107 百欧博伟 质粒菌种
  • 下一篇:化妆品检测用菌——铜绿假单胞菌