MDCC-MSB-1鸡淋巴瘤细胞的特性及运输与保存！
小杨 / 2024-02-21 09:01:10
一、细胞简介
规格：1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息：MDCC-MSB-1
产品简称：MDCC-MSB-1
细胞数量：1*10^6
组织来源：--
形态特征：--
生长方式：悬浮
背景描述：--
培养条件：89%1640+10%FBS+1%双抗,气相：空气，95%；二氧化碳，5%；温度：37℃
换液频率：--
传代比例：--
冻存液配方：90%FBS+10%DMSO
安全性：BSL-1
供应限制：仅供科研
运输方式：常温运输（T25培养瓶）
细胞用途：仅供科研使用。
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、细胞特性
1）来源：鸡淋巴瘤
2）形态：淋巴母细胞
3）含量：>1x106 个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
三、细胞的运输和保存
使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
四、细胞培养步骤
1、培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基(GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L，0.05mM β-巯基乙醇)，85%；优质胎牛血清，10%，鸡血清，5%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2、细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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