二倍体细胞培养法
二倍体细胞培养法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为:
1. 吸除旧培养液注入另瓶中。
2. 用温BSS冲洗1次。
3. 用0.25%温胰蛋白酶消化,加入消化液量以仅覆盖细胞层即可;作用1~5分钟。
4. 待细胞附着松动、细胞质边缘卷起和间隔加大,便终止消化。为防止细胞丢失,可不必再用BSS冲洗,直接向瓶中加入培养液(新旧培养液按2:1新旧混合)。
5. 轻轻反复吹打制成单个细胞悬液。
6. 按一分为二比例接种培养。