嗜酸乳杆菌：益生菌类保健食品的生产和研究
小杨 / 2024-04-12 09:29:30
嗜酸乳杆菌属于乳杆菌属，革兰氏阳性杆菌，杆的末端呈圆形，主要存在小肠中，释放乳酸，乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素，但是抑菌作用比较弱。嗜酸乳杆菌不仅在胃中，它还是人体小肠内的主要益生菌。
一、菌种简介
提供形式：冻干物
拉丁属名：Lactobacillus Acidophilus
属名：Lactobacillus
种名加词：acidophilus
其它中心编号：=JCM 11047
来源历史：←JCM←T．Itoh LA67
收藏时间：2007.01.00
资源归类编码：15131319101
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；生产
具体用途：用于益生菌类保健食品的生产。
生物危害程度：四类
致病对象：无
分离基物：人的排泄物
培养基：酪蛋白胨(胰酶消化) 10g，肉汤提取物 10g，酵母粉 5g，葡萄糖 20g，吐温80 1g，K2HPO4 2g，醋酸钠 5g，柠檬酸二铵 2g，MgSO4·7H2O 0.2g，MnSO4·H2O 0.05g，pH6.2～6.5。
培养温度：37℃
资源保藏类型：培养物
保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
实物状态：有实物
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
用途：研究；生产；用于益生菌类保健食品的生产。
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、培养基
MRS 培养基
酪蛋白胨 10 克 牛肉浸取物 10 克
酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克
乙酸钠 5.0 克 柠檬酸二胺 2.0 克
吐温 80 1.0 克 磷酸氢二钾 2.0 克
七水硫酸镁 0.2 克 七水硫酸锰 0.05 克
碳酸钙 20.0 克 琼脂 20.0 克
蒸馏水 1.0 升 PH 6.8
如果要配制液体培养基，则不用加入碳酸钙和琼脂
三、培养方法
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。
四、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
五、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。
六、注意事项
1）乳酸菌需要在比较厌氧的环境下培养首次活化，干粉要全部用完，不能保留，干粉用尽量少的腹水液溶解，接种在 5ml 的液体培养基中，静止培养；因冻干菌种处于休眠状态，请勿接种多支液体培养基，以免因接种量不足而导致复苏不成功。如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；二次接种量要多，固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显，液体培养要静止培养；
2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年
5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和
微生物菌种查询网联系。
七、单层冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。
2、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；
3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。
4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。
5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。
6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
欢迎访问
微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！
下载附件
上一篇：小鼠原代视网膜色素上皮细胞的运输和保存及使用！
下一篇：微生物培养基的概念与分类及储存与制备！