抗生素对微生物生长的最低抑制浓度的测定方法！
小杨 / 2024-03-19 08:44:42
一、实验原理
很多化学药剂都可以抑制微生物的生长。最低抑制浓度（minimal inhibition concentration, MIC）是指药物抑制微生物生长的最低浓度。由于微生物对药物的耐受性不同，因此，最低抑制浓度是有差异的。可以采用固体或液体培养的方式进行测定，通过制备含有不同浓度的抗生素平板，将供试菌株接种，然后将平板置适宜温度下培养一定时间，观察菌株生长情况。
判断MIC 可以供试菌株不生长的平板所含的药剂浓度，也可以按重复接种点长出的菌落数少于5 个者作为MIC 标准。固体平板法的优点是在一个平板上可同时点接多个菌株。值得注意的是，当加入药剂后，需要立即充分摇匀后再制备平板，否则药剂分散不均匀，会影响结果。
另一种方法是液体稀释法，将一定培养液中加入不同浓度的药剂，配置成一定浓度梯度，再将制备好的菌悬液按一定体积接种，置一定温度培养后，可通过肉眼或分光光度计测定浊度，以不能生长菌株的试管内药剂的浓度为MIC, 药剂的浓度以μ（单位）/ml 或μg/ml 表示。
本实验学习液体法检测链霉素对细菌的最低抑制浓度。
二、实验材料
2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基（液体）
3、药剂：链霉素：1000 μ（单位）/ml (过滤灭菌)
4、器皿：无菌培养皿，无菌移液管（1ml, 5ml），无菌试管，无菌水，分光光度计
三、实验方法
1、取活化好的菌种斜面，分别挑取一环接种于液体培养基中，在37℃下培养6-8 小时，作为测试菌液。
2、按下表配置不同链霉素浓度的培养基（每个试管3 个重复）：
3、分别取0.2ml 菌液加入上述试管中，充分混匀，另做两个对照，即：只含菌和只含药剂
4、将试管置37℃温箱培养12-24 小时，取出试管，充分振荡，用肉眼观察每个试管浊度，也可用分光光度计检测浊度。
四、实验结果
注意：
1、注意菌龄适宜，接种量一致，避免人为因素干扰结果；
2、加入药物立即混匀后再接入菌种。
3、每个处理应设3 个重复。
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