细胞系特征
微生物菌种查询网编号:KCB201001YJ
细胞株名称:MA104 长尾绿猴肾细胞
种属: Cercopithecus aethiops
组织来源:胚胎 肾
生长特性:贴壁生长
形态特征:上皮样细胞
Virus Susceptibility:Simian rotavirus
支原体:(-)
培养条件:完全培养基:90%MEM培养液(内含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清
培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
传代方法:收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传三。
注:1、观察细胞最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
冻存方法:冻存液:90%完全培养液,10%DMSO.现用现配
储存:液氮储存
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