黑白轮枝孢的注意事项及冻干管打管说明书！
小杨 / 2022-07-12 09:00:04
黑白轮枝孢（中文俗名：苜蓿黄萎病菌），菌落白色，菌丝老化时培养基基质内圈黑色，外围白色。菌丝体无色或淡褐色，分隔规则，膨胀加粗变褐，成为黑色的休眠菌丝。不形成微菌核，分生孢子梗轮枝状，一般有2-4层轮生分枝，偶有7-8层，老熟分生孢子梗基部呈暗色，为其独有特征（人工培养这一特点消失）。分生孢子椭圆形，单胞无色。注意与大丽轮枝菌进行区分。
一、菌种简介
平台编号：Bio-08710
规格：斜面培养物
拉丁属名：Verticillium Albo-Atrum
中文译名：黑白轮枝孢
拉丁学名：Verticillium albo-atrum
菌株来源：←中国科学院微生物研究所
直接来源国家：中国
保藏时间：3/1/1971
生物危害：四类
模式菌株：非模式菌株
菌株用途：棉花黄萎病菌(测定用)
培养温度：25-26℃
培养基：0014
提供形式：斜面培养物/平板
用途：棉花黄萎病菌(测定用)
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）
二、培养基
PDA 培养基
马铃薯浸取液 1.0 L 葡萄糖 20.0g 琼脂 15.0g PH 7.0
[注]马铃薯浸取液配制方法：马铃薯洗净去皮，取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 30分钟后滤去马铃薯块，将滤液补足 1000ml。
三、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。
四、注意事项
1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、菌种恢复培养前，建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，如在说明建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间，直至菌种培养完成，有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。
3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。
4、恢复培养厌氧菌时，在操作过程中应严格控制厌氧条件：制作培养基时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气，使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org）。
五、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂（应避免过多水蒸气影响菌种的复苏），用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、用无菌吸管吸取 0.3ml（建议勿超过 0.5ml）液体培养基(不添加琼脂)，滴入管内，轻轻振荡，待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状，在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中（不超过 2 支，单位所提供的培养基配方中有琼脂，请务必做成试管斜面，配方中没有琼脂，试管中液体培养基不超过 5ml），并在建议的条件下静止培养。
3、冻干管打开后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。
4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。
6、菌种复苏时，请务必记录好菌种的编号和制备批号，请在收到菌钟后 2 个月内联系，否则不予售后。
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