人肺泡上皮细胞的用途与提取方法及注意事项!
小杨 / 2022-07-08 09:04:33


一、细胞简介
人肺泡上皮细胞由肺泡I型和Ⅱ型上皮细胞组成,线性分布于肺内99%以上的表面积。肺泡I型细胞是一种大而扁平细胞,其稀薄的细胞质延展占据了其内表面积的95%以上。它含有水通道,是所有哺乳动物细胞中水渗透性最高的细胞。肺泡Ⅱ型上皮细胞只占据了2-5%的面积,它能产生,分泌并再利用肺表面活性物质。肺泡Ⅱ型上皮细胞同时含有Na+-K+-ATP酶和阿米洛利敏感的上皮细胞Na+通道。目前被普遍接受的假说是肺泡Ⅱ型上皮细胞通过调节肺Na+传递的活性来维持着肺液体内环境稳定平衡,而肺泡I型细胞是无活性的细胞,仅提供屏障功能而无活化功能。新近的研究表明肺泡I型在调节离子和液体转运过程中也具有重要作用。

二、产品信息
平台编号:Bio-131290
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:AEC
细胞名称:人肺泡上皮细胞AEC
产品规格:T25培养瓶x1;1.5ml冻存管x2
细胞数量:1x10^6;1x10^6
保存温度:37℃;-198℃
运输方式:常温保温运输;干冰运输
安全等级:1
用途限制:仅供科研1类
培养体系:DMEM高糖培养基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%双抗(Hyclone)
培养温度:37℃
二氧化碳浓度:5%
简介:人肺泡上皮细胞AEC取自女性肺泡正常组织,上皮样,贴壁培养。经过SV40永生化处理。
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
  
三、冻存条件
无血清冻存液。

四、产品用途
仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的。

五、提取方法
人肺泡上皮细胞(HPAEpiC)提取于人肺组织,原代冻存。每管含有细胞数>1×106cells/ml,此细胞通过Cytokeratin-18,-19和Vimentin免疫荧光染色验证,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

六、验收细胞注意事项
1、收到人肺泡上皮细胞AEC细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。
2、收到人肺泡上皮细胞AEC细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人肺泡上皮细胞AEC细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右,血清浓度还是在10%。
4、收到人肺泡上皮细胞AEC细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下5-10ML培养基继续培养:超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心3分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。
6、24小时后,人肺泡上皮细胞AEC细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2培养。
特别提醒:原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。

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