用作抗菌素效价测定指示菌的:清酒酵母
小杨 / 2022-07-01 08:47:38


清酒酵母是Saccharomyces属的微生物,原产地为中国。利用葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、棉子糖;不利用可溶性淀粉、D-木糖、D-阿拉伯糖、L-鼠李糖、核糖醇、柠檬酸、肌醇。主要用途为分类;研究;教学,具体用途为苹果酸。 

一、菌种简介
平台编号:Bio-52575
规格:冻干物
拉丁属名: Saccharomyces Sake Yabe
中文名称:清酒酵母
拉丁名称:Saccharomyces sake Yabe
来源历史:ACCC  ←上海第三制药厂
原产国:中国
模式菌株:否
主要用途:作抗菌素效价测定指示菌。
生物安全级别:一级
其它保藏中心编号:ACCC 20045
培养基编号:13
培养温度:25-28℃
培养时间:24-48h
需氧类型:好氧
采集地:上海第三制药厂
用途:作抗菌素效价测定指示菌。
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、基本概念
(1)菌群:由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体,具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2)菌属:菌种的上一级分类,通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属,如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌最基本的分类单位,通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体,与同属内其他种有着明显差异;当涉及到细菌保存时,菌种是指细菌的种子(用来长期保存)资源。
(4)菌型:同一菌种的不同细菌,在某些方面存在较小差异的为同一菌型,通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5)菌株:由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。

三、使用范围
(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,酿酒酵母菌组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 
(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 
(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 

四、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、操作流程 
菌株复苏:(按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏) 
1)所有菌株,显色培养基分4区,每区一株,标明菌株号、菌种名常用缩写如下: 
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 热带念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隐球菌,其他菌种标记全名。 
2)隐球菌除传显色培养基以外,另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h 
菌种鉴定:(48h后观察结果)。

六、保藏方法
1、传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2、液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3、载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5、冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

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