红发夫酵母的培养方法与实验内容及使用范围!
小杨 / 2022-03-22 09:13:19


红发夫酵母(Phaffia rhodozyma)是真菌界、真菌们、半知菌亚门(Deuteromycotina)、隐球酵母科(Cryptococcacceae)、红发夫酵母属的唯一一种。繁殖方式为无性繁殖中的芽殖,无有性生殖。红发夫酵母为专性好氧菌,细胞产生类胡萝卜素需要大量氧气。葡萄糖和蔗糖为最佳碳源,酵母膏是最佳氮源。

一、菌种简介
平台编号:Bio-33714
规格:培养物
拉丁属名:Phaffia Rhodozyma
中文名称 :红发夫酵母
拉丁属名 :Phaffia
种名加词 :rhodozyma M.W. Mill., Yoney. & Soneda 
收藏时间* :2007-11-21
来源历史 :中国林业科学研究院林业研究所
原产国 :中国
资源归类编码 :15151113124
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;教学
具体用途:产虾红素
生物危害程度:四类
致病对象:无
培养基信息:培养基编号: 14 培养基名称: PDA
培养温度:28
资源保护类型 :培养物
保藏方法:定期移植法
共享方式:资源交换性共享
提供形式:斜面培养物
实物状态:有实物
用途:产虾红素
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

二、背景介绍
红发夫酵母以单细胞为主,有时能形成假菌丝。菌落因菌体产生虾青素等类胡萝卜素而呈红色,类胡萝卜素均匀地分布于细胞脂质中。
红发夫酵母具克拉布特里效应(Crabtree)。红发夫酵母生长温度范围为4~27℃,属于兼性嗜冷的低温型微生物。最适生长pH为6.0,色素形成的最适pH为5.0。 

三、相关知识
虾青素等类胡萝卜素具有显著的抗氧化作用,可延缓衰老,预防肿瘤。在水产养殖业中含虾青素的饲料能使鲑鱼、鳟鱼的皮肤、肌肉像野生鱼一样呈鲜艳的红色,可增加鱼的抗病能力,提高鱼的繁殖能力,因此开发虾青素具有广阔的市场。红发夫酵母因高产虾青素而备受人们关注。

四、菌种的培养
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

五、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

六、使用范围
(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 
(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 
(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 

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