动物双歧杆菌乳亚种的培养与注意事项!
小杨 / 2021-06-21 09:01:03


动物双歧杆菌乳亚种是Bifidobacterium属的微生物,原产地为中国。菌株呈短、弯曲棒杆有时呈双歧棒状,G+,不运动,无芽胞。严格厌氧,化能异养型。利用蔗糖、乳糖、麦芽糖、淀粉产酸,牛奶弱水解。生长需求多种维生素。氧化酶、接触酶阴性。硝酸盐还原、明胶液化阴性。主要用途为研究;生产,具体用途为乳制品发酵,乳饮料。

一、菌种简介
平台编号:bio-84741
提供形式:冻干物
拉丁属名:Bifidobacterium animalis subsp. lactis
中文名称:动物双歧杆菌乳亚种
拉丁名称:Bifidobacterium animalis subsp. lactis
其它保藏中心编号:=CGMCC 1.2226=DSM 10140 =CIP 105265 =JCM 10602
来源历史:←CGMCC←DSMZ
收藏时间:2017/6/27
原始编号:UR1
原产国:瑞士
资源归类编码:15131527101
模式菌株:模式菌株
主要用途:分类;研究
特征特性:短棒杆状,直或弯曲,单个或成对排列,革兰氏阳性。16S rDNA GenBank序列号:X89513。全基因组序列号:CP001606。
生物危害程度:四类
培养基编号:CM0787
培养基名称:强化梭菌琼脂培养基(ATCC1053)
培养基成分:肉汁 10g,蛋白胨 5g,酵母粉 3g,D(+)-葡萄糖 5g,淀粉 1g,NaCl 5g,NaAc 3g,L-半胱氨酸盐酸盐 0.5g,蒸馏水 1.0L,琼脂 15g,121℃湿热灭菌15min。如需要可添加多粘菌素B(0.02 g /L)。pH 6.8± 0.2 (25℃)。
培养温度:37℃
需氧类型:厌氧
分离基物:酸奶
采集地:瑞士
保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享
用途:分类;研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
储存条件:冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。

二、培养条件
1、培养基编号:CM0787
2、培养基成分:肉汁 10g,蛋白胨 5g,酵母粉 3g,D(+)-葡萄糖 5g,淀粉 1g,NaCl 5g,NaAc 3g,L-半胱氨酸盐酸盐 0.5g,蒸馏水 1.0L,琼脂 15g,121℃湿热灭菌 15min。如需要可添加多粘菌素 B(0.02 g /L)。pH 6.8± 0.2 (25℃)。
3、需氧类型:厌氧
4、培养温度:37℃

三、培养方法
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

四、使用范围
(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 
(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 
(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 

五、注意事项
1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系菌种。

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