肠膜明串珠菌的培养方法与注意事项！
小杨 / 2021-05-28 08:43:45
肠膜明串珠菌是乳酸菌中的明串珠菌属的重要菌种。肠膜明串珠菌革兰染色阳性。一般存在于植物体表，常用于发酵乳制品、青贮、泡菜和果酒中。肠膜明串珠菌包括有肠膜明串珠菌乳脂亚种和葡萄糖亚种，尤以肠膜明串珠菌的乳脂亚种最为常见，他可发酵柠檬酸而产生特征风味物质，又称风味菌、香气菌和产香菌。
一、菌种简介
平台编号：bio-67753
规格：冻干物
拉丁属名：Leuconostoc mesenteroides
菌株名称：肠膜明串珠菌
其它编号：CICC 21861
培养基编号：58
培养温度：37
培养时间：48 小时
用途：用于发酵制乳制品，生产青贮饲料，制作泡菜
分离源：泡猪耳朵
培养基信息
培养基编号：58
名称：MRS培养基
备注：酷蛋白胨 10.0克 牛肉浸取物 10.0克 酵母提取液 5.0克 葡萄糖 5.0克 乙酸钠 5.0克 柠檬酸二胺 2.0克 吐温80 1.0克 磷酸氢二钾 2.0克 七水硫酸镁 0.2克 七水硫酸锰 0.05克 碳酸钙 20.0克 琼脂 20.0克 蒸馏水 1.0升 pH6.8
用途：用于发酵制乳制品，生产青贮饲料，制作泡菜
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
二、培养基
MRS 培养基
酪蛋白胨 10 克 牛肉浸取物 10 克
酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克
乙酸钠 5.0 克 柠檬酸二胺 2.0 克
吐温 80 1.0 克 磷酸氢二钾 2.0 克
七水硫酸镁 0.2 克 七水硫酸锰 0.05 克
碳酸钙 20.0 克 琼脂 20.0 克
蒸馏水 1.0 升 PH 6.8
如果要配制液体培养基，则不用加入碳酸钙和琼脂
三、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请在-20°C 保存。
四、注意事项
1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或斜面）；若接种液体培养基，则试管斜面以不超过 5ml 为宜。
2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；
3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；
5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；
6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和中国微生物菌种查询网联系。
7）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌钟后 2 个月内联系，逾期不予受理；
8）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。