杆状脱硫微菌的储存与培养条件及注意事项!
小杨 / 2021-04-21 08:46:07


一、菌种简介
平台编号:bio-04608
提供形式:冻干物
拉丁属名:Desulfomicrobium baculatum
中文译名:杆状脱硫微菌
拉丁学名:Desulfomicrobium baculatum
原始编号:DSM 4028
菌株来源:←DSMZ
保藏人:周宇光
直接来源国家:德国
保藏时间:9/2/2003
其他保藏编号:=VKM B-1378
生物危害:四类
模式菌株:模式菌株
菌株用途:模式菌株
培养温度:30℃
培养基:0897    
其他培养条件:厌氧
分离源:锰矿石
用途:模式菌株
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

二、储存条件
冻干菌种和试管斜面请置于 6-10℃冷藏。

三、培养条件
【编号】 0897 【名称】 DESULFOVIBRIO MEDIUM
【成分】 DSM 63 DESULFOVIBRIO MEDIUM
溶液 A:
K2HPO4 0.5 g NH4Cl 1.0 g Na2SO4 1.0 g
MgSO4·7 H2O 2.0 g DL-乳酸钠 2.0 g 酵母提取物 1.0 g
Resazurin 1.0 mg CaCl2·2H2O 0.1 g 蒸馏水 980.0 ml
溶液 B:
FeSO4 · 7 H2O 0.5 g 蒸馏水 10.0 ml
溶液 C:
巯基乙酸钠 0.1 g 维生素 C0.1 g 蒸馏水 10.0 ml
用适量水分别溶解溶液中各种成分。溶液 A 煮沸几分钟后冷至室温,加无氧 N2气。用 NaOH 调节溶液 B 和 C 的 pH 至 7.8,并在 N2 下分装(随时摇动培养基)至厌氧管中。121°C 灭菌 15 分。

四、注意事项
1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、菌种恢复培养前,建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,如在说明建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成,有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。
3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。
4、恢复培养厌氧菌时,在操作过程中应严格控制厌氧条件:制作培养基时,应使用厌氧螺口试管,并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气,使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、与菌种相关的其它信息请参阅中国微生物菌种查询网网站(www.biobw.org)。

五、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂(应避免过多水蒸气影响菌种的复苏),用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、用无菌吸管吸取 0.3ml(建议勿超过 0.5ml)适宜的液体培养基(不添加琼脂),滴入管内,轻轻振荡,待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状,在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中(不超过 2 支,中国微生物菌种查询网提供的培养基配方中有琼脂,请务必做成试管斜面,配方中没有琼脂,试管中液体培养基不超过 5ml),并在建议的条件下静止培养。
3、冻干管打开后需一次用完,不能留存。另外,安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。
4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。
6、菌种复苏时,请务必记录好菌种的编号和制备批号,否则不予售后。

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