一、细胞简介
平台编号：bio-54053
提供形式：复苏状态
拉丁属名：Mv.1.Lu(NBL-7)
细胞名称：Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮细胞
中文名称：貂肺上皮细胞
描述：银貂细胞。 用于鼠科动物及野生肉瘤病毒的焦点形成检测。
动物种别：貂
性别：
组织来源：胚胎，肺
形态：上皮细胞样
培养基和添加剂：MEM培养基(GIBCO,货号41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；0.1mM NEAA；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。
供应限制：仅供研究之用。
REFERENCE：Henderson IC, et al.,Virology,60,282-287,1974. PubMed: 4366800
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。
二、貂肺上皮细胞的分类和作用
1、分类
上皮组织(貂肺上皮细胞)分为被覆上皮、腺上皮和感觉上皮三类，而通常所说的上皮就是指被覆上皮。
上皮细胞(貂肺上皮细胞)按细胞层数可分为单层和复层两类，按形状可分为柱状和鳞状。
柱状上皮细胞：主要分布于鼻腔、鼻咽、器官、肺、胃、肠、子宫颈、子宫内膜及输卵管等部位。
鳞状上皮细胞：被覆于全身皮肤、口腔、喉部、鼻咽的一部分、食道、**的全部以及子宫颈。鳞状上皮细胞分为基底层细胞、中层细胞和表层细胞。
2、作用
皮肤外层的上皮细胞普遍角质化，有保护和吸收的作用。
腔道中的上皮细胞多分化，有分泌，排泻和吸收等功能。
消化器官和肺等器官表面的上皮细胞，对于消化吸收、交换氧等发挥着重要作用。
三、貂肺上皮细胞的培养过程
1、取产后的新鲜脐带。如不立即(貂肺上皮细胞)培养可以保存于4℃中，但不宜超过12小时。无菌剪取长10～15厘米一段。其它如胚胎和幼体动物的大血管，亦可用于培养。
2、先用三通注射器吸温PBS液注入脐带的静脉中，洗除残血，注入口处宜用线绳结扎，以防液体返流。
3、用血管钳夹紧脐带一端，从另端向脐静脉中徐徐注入*终浓度为0.1%的胶原酶，待末端出现液体后结扎之，令充满血管，注入口亦应结扎，以防液体返流，消化3～10分钟。
4、吸出含有内皮细胞的消化液，注入离心管中，为获取更多细胞，可再注入温PBS冲洗2～3次彻底清除干净残余细胞，一并注入离心管中离心。
5、吸除上清，加1640培养液，制成细胞悬液，接种入瓶皿中培养，顺利时2～3天内细胞即可长成单层。
四、貂肺上皮细胞的培养方法
（一）表皮细胞培养
1、取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。
2、EDTA处理：先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。
3、(貂肺上皮细胞)冷消化：换入0.25%胰蛋白酶中，置4℃过夜。
4、分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。
5、温消化：取出表皮单独处理，用剪刀剪成更小的块后，置入新的0.25%胰蛋白酶中，37℃再消化30～60分钟。
6、用吸管轻轻反复吹打，使成细胞悬液。
7、(貂肺上皮细胞)培养液：通过80目不锈钢纱网滤过后，低速离心，吸上清，直接加入Eagle液和20%小牛血清，制成细胞悬液，接种入碟皿中，CO2温箱培养。
（二）乳腺组织培养
直接培养法：（适于培养含纤维少的软组织）
1、貂肺上皮细胞在含有少量培养液或Hanks液的容器中，用锋利刀片将组织反复切割成碎块。
2、把组织碎块连同液体注入离心管中，再补加少许培养液，用吸管吹打片刻，置试管架3～5分钟。吸除上层液可排除非乳腺细胞部分。重复2～3次。
3、貂肺上皮细胞末次处理结束后，向沉降管中再补加培养液，用吸管稍吹打，使沉降物重悬。不待细胞团块下降立即通过3～4层无菌纱布滤入另管中。
4、调整好适宜密度，接种入培养瓶中培养。
胶原酶消化法：（适于处理含纤维多的较硬组织）
其过程与培养其它组织相同。
（三）胃上皮细胞培养
1、取材：取胃溃疡或胃癌手术切除胃标本远端非病变区粘膜少许。
2、清洗：(貂肺上皮细胞)用含庆大霉素（400微克/毫升）和二性霉素（2微克/毫升的Hanks）液漂洗后，用钝器剥离下粘膜，剪成1mm3大小。
3、消化：在I型胶原酶和透明质酸酶中，于37℃中消化80分钟。
4、离心：收集细胞悬液，800转/分离心后，Hanks液漂洗两次。
5、接种：(貂肺上皮细胞)末次离心后加入含有1%～2%胎牛血清的完全培养基，接种入不同孔数的培养板中，接种量依不同实验目的而定。
（四）肝细胞培养
初代组织块培养：取新鲜肝脏，先剥除被膜和血管等纤维成分，用刀或剪刀把肝脏剪成1mm3左右的小块，采用帖壁培养法。
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