一、细胞简介
平台编号：bio-73112
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
拉丁属名：NIH/3T3
细胞名称：NIH/3T3（小鼠胚胎细胞）
种属：小鼠
年龄（性别）：胚胎
组织来源：胚胎
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
背景描述：NIH/3T3细胞是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚克隆。NIH/3T3细胞对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，对DNA转化及转染研究十分有用；NIH/3T3细胞鼠痘病毒阴性。
生长培养基：DMEM高糖(货号:PM150210)＋10% CS＋1% P/S(货号:PB180120)
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用
二、细胞描述
与原始的随机交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法一样，NIH/3T3，是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触抑制的连续细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了五轮以上亚克隆。这株细胞对DNA转化及转染研究十分有用。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。
三、培养条件
完全培养基：90%DMEM培养液（内含2mM L-glutamine）+10%胎牛血清
培养条件：37.0Ccarbon dioxide(CO2),5%
四、传代方法
收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：
如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。
如果细胞已长满（达80-90%），即可进行传代培养。具体步骤如下：
1、弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2、加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热，然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3、按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传三。
注：1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。
五、冻存方法
冻存液：90%完全培养液，10%DMSO.现用现配
储存：液氮储存
六、注意事项
1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
3、用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4、静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细胞汇合度 80%左右时正常传代。
5、请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6、建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和中国微生物菌种查询网（www.biobw.org）技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回直至问题解决。
7、该细胞只可用于科研。