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    金黄色葡萄球菌金黄色亚种的培养与注意事项!


                                                             

    金黄色葡萄球菌金黄亚种微生物菌种基因资源为传统产业特别是传统农业的改造和转型提供了不可替代的生物种质和基因资源,孕育和促进了我国新的生物技术产业尤其是农业高新技术产业的形成和壮大。

    一、菌种简介
    平台编号:bio-52504
    规格:冻干物
    拉丁属名:Staphylococcus aureus subsp.
    菌株名称:金黄色葡萄球菌金黄色亚种
    其它编号:ATCC25923、AS1.2386
    培养基编号:2
    培养温度:37℃
    培养时间:18-24 小时
    用途:抗生素敏感试验质控菌株
    注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。

    二、培养基
    *营养琼脂培养基(NA)
    *胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSA)
    *LB 培养基(以上三种任选一种即可)

    三、保藏条件
    斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存,西林瓶请放-20°C 保藏。 

    四、注意事项
    1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,参照“开管说明”,用无菌吸管吸取 0.5ml的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支斜面或平板;或直接接种液体培养基);经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间;若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
    2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
    3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
    4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
    5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。
    6)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;
    7)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
    8)西林瓶开封:用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖,注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用 75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入0.5ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。
    9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。

    五、金黄色葡萄球菌金黄亚种建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。 
    1、安瓶管开封 
    用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。 
    用火焰将安瓿管顶端加热。 
    滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。 
    用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。 
    2、菌株恢复培养 
    用无菌吸管,吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻振荡,使冻于菌体溶解呈悬浮状 
    取0.1-0.2ml菌体悬浮液,移植于适宜的琼脂斜面/平板培养基上,剩余的菌液,注入适宜的液体培养基内,然后在建议的温度下培养。  
    3、注意事项 
    菌种活化前,请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。 
    厌氧菌的培养,如无特别说明,自开封至接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态。 
    某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二重复一次。

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