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    龟裂链霉菌知识简介与注意事项!


    一、基本信息
    平台编号:bio-51902
    规格:冻干物
    拉丁属名:Streptomyces rimosus Sobin et al.
    菌株名称:龟裂链霉菌
    其它编号:AS4.748
    培养基编号:14
    培养温度:28℃
    培养时间:5-7 天
    形态:孢子丝初旋至螺旋形。孢子长圆形至柱形,表面光滑。
    用途:产土霉素
    注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

    二、菌株简介
    龟裂链霉菌,蔗糖硝酸盐琼脂:气丝白色,斑片状,在边缘。基丝薄,乳脂色,后较丰厚,红褐色至橙色。可溶色素略微黄色。葡糖天冬素琼脂:气丝白色,基丝初乳脂色,后变微褐色至橙褐色。可溶色素微黄色至金色。淀粉琼脂:无气丝。基丝乳脂色,中心褐色。甘油天冬素琼脂(ISP)、无机盐淀粉琼脂(ISP)、酵母精麦芽精琼脂 (ISP)、燕麦粉琼脂(ISP):气丝白色或淡黄色、淡橙黄色、灰黄粉色。基丝反面灰黄色,在第一和第三种培养基上略加红色(橙黄色至暗橙黄色)。基丝色对pH不敏感。可溶色素迹量黄色,对pH不敏感。营养琼脂:气丝白色或无。基丝少,乳脂色至黄褐色、鼠灰色。可溶色素无或微黄色。葡萄糖酵母精琼脂:气丝初白色,后变鼠灰色。基丝较好,乳脂色至微褐色。可溶色素微黄至金色。马铃薯块:气丝白色至灰色、暗褐色。基丝乳脂色至红褐色。可溶色素黄褐色。 明胶液化慢。牛奶胨化,不凝固。淀粉水解有限。纤维素上不生长。硝酸盐还原。不产生类黑色素、酪氨酸酶和H2S。利用D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-果糖、鼠李糖、肌醇、 D-甘露醇;对D-木糖利用可疑;不利用蔗糖、棉子糖。产生对革兰氏阳性和阴性细菌、原虫都有作用的土霉素 (oxytetracycline)和抑制丝状真菌、酵母的龟裂杀菌素 (rimocidin)。

    三、培养基
    综合马铃薯培养基(PDA)
    20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
    Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然
    20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。 

    四、保藏条件
    斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。 

    五、注意事项
    1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 支斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
    2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
    3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
    4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
    5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。

    六、单层冻干管打管说明书
    1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
    2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;
    3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。
    4、冻干管打开后需一次用完,不能留存。
    5、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

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