W303-1A酿酒酵母菌株知识简介与使用说明!
小杨 / 2021-01-08 09:09:44


产品信息
平台编号:bio-108880
规格: 1mL 甘油
拉丁属名:W303-1A酿酒酵母菌株
菌株名称:W303-1A
产品形式:15%甘油菌
储存:﹣80℃
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

基因型
MATa {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15}
 
基本信息
培养基:YPD
菌株类别:酵母菌
培养条件:28℃,有氧,YPD
质粒转化:电激
保存方式:15%甘油,-80℃
基本应用: 
备注:

菌株简介
W303-1A possesses a ybp1-1 mutation (I7L, F328V, K343E, N571D) which abolishes Ybp1p function, increasing sensitivity to oxidative stress.
References: W303 constructed by Rodney Rothstein (see detailed notes from RR and Stephan Bartsch).
ybp1-1 info: Veal et al. (2003) J. Biol. Chem. 278:30896-904.
Sources: Biosystems:YSC1058

使用说明
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

注意事项
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

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