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    ATCC 35967斯氏李斯特氏菌菌种说明!


                                                             

    一、菌种简介
    平台编号:bio-53040
    规格:冻干物
    拉丁属名:Listeria seeligeri
    菌株名称:斯氏李斯特氏菌
    其它编号:ATCC 35967
    培养基编号:114
    培养温度:37
    培养时间:18-24 小时
    用途:研究、质量控制
    注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

    二、培养基
    (血平板琼脂培养基)

    三、保藏条件
    斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。 

    四、斯氏李斯特氏菌低温保存法
    1、简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。
    2、液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

    五、注意事项
    1) 首次活化,干粉粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在1-2 个平板上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;二次接种量要多,固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显,液体培养要静止培养;
    2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
    3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
    4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
    5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。

    六、单层冻干管打管说明书
    1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
    2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;
    3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。
    4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。
    5、冻干管打开后需一次用完,不能留存。
    6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

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