铜绿假单胞菌的培养条件与注意事项！
小杨 / 2020-05-15 08:46:33
铜绿假单胞菌俗称绿脓杆菌，广泛存在于自然界、人体皮肤、肠道和呼吸道中。为条件致病菌，当机体免疫力低下时，可引起继发感染和混合感染。本菌为革兰染色阴性小杆菌，无芽孢，无荚膜，有菌毛，菌体一端有丛鞭毛。需氧。普通培养基上生长良好，能产生水溶性蓝绿色绿脓素和绿色的荧光素，并扩散至培养基。抵抗力强，对多种抗生素易产生耐药性。
一、菌种简介
平台编号：bio-60002
提供形式：冻干物
拉丁属名：Pseudomonas aeruginosa
中文名称：铜绿假单胞菌
属名：Pseudomonas
种名加词：aeruginosa
其它中心编号：=ATCC 27853
来源历史：←中国检验检疫科学研究院（12625）←内蒙古出入境检验检疫局
收藏时间：2008.1.5
资源归类编码：15131134101
模式菌株：非模式菌株
用途：研究；分析检测；研究、质量控制
主要用途：研究；分析检测
具体用途：研究、质量控制
特征特性：G-杆菌，赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶均阴性，氧化酶、精氨酸双水解酶均阳性，吲哚、伏-普实验阴性，发酵葡萄糖、果糖，不发酵乳糖，不产H2S。产生绿脓素。专性好氧，最适pH7.4~7.6。
生物危害程度：三类
致病对象：人畜共患
致病名称：伤口感染等
培养基：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4.H2O，则有利于产生芽孢。
培养温度：37℃
资源保藏类型：培养物
保存方法：真空冷冻干燥法
实物状态：有实物
共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享
二、储存条件
冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。
三、培养条件
1、培养基编号：CM0002
2、培养基成分：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入 5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。
3、需氧类型：好氧
4、培养温度：37℃
四、注意事项
1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和中国微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。
五、冻干管打管说明书
1、安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒，将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热；立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位，使管壁破裂；再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀，并取 100μL 转接到固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，需要转接至 2-3 代恢复活力。
4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。
5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏（特殊除外）。
6、冻干管打开后需一次用完，不能留存。
7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。
8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。