毕赤酵母SMD1168H美国ATCC质控微生物
小杨 / 2019-10-19 09:04:22
基本信息
平台编号：bio-82061
规格：冰袋泡沫盒快递
拉丁属名：0
中文名：毕赤酵母SMD1168H
英文名：Pichia pastoris Strain SMD1168H
货期：款到1-3天出库
运输：冰袋泡沫盒快递
培养方式：YPD,30℃
保存：1ML，甘油管，-80℃
简单介绍
毕赤酵母SMD1168H菌种生物缓冲物质的质量要求严格，如pKa值约在6~8之间；在有机溶剂中要有极小的溶解性；毕赤酵母SMD1168H菌种对生物膜要较无渗透性；受浓度、温度，以及介质中离子的影响要极小；能与阳离子形成可溶性络合物；干燥或溶液状态有极好的稳定性等。
产品特点
⒈染色体上携带由lacUV5启动子控制的T7 RNA聚合酶基因，故在IPTG诱导下，可以高效表达T7启动子驱动的外源基因。
⒉携带pLysS质粒，该质粒使菌株为氯霉素(34μg/mL)抗性，其lysS基因编码的T7溶菌酶可以阻止T7 RNA聚合酶和其启动子的结合，阻断背景表达，故本菌株主要用于毒性蛋白的表达。
⒊由于pLysS的复制起始位点为p15A型，跟复制起始位点为ColE1和pMB1型的质粒兼容，故外源基因可以克隆到pUC系列或pBR322系列的质粒中。
⒋缺失lon和ompT两个蛋白酶基因，有利于外源蛋白的纯化。
⒌EcoB系统Eco位点识别能力缺失，导致EcoB甲基化修饰和限制功能均失，甲基化和非甲基化质粒均可转入本菌种。
⒍本菌株具有氯霉素抗性。
产品描述
毕赤酵母SMD1168H菌种各种不同类型的细胞为了在即使进行了好几轮的分裂后也能保持其特征，每个细胞都必须“牢记”哪些基因在分裂前是激活的并将这些记忆传递给子细胞。细胞通过一种“书签”过程来应对这种挑战。便利贴能在书本中标出*后阅读的页码，用同样的方式，特定的分子在细胞中对激活的基因进行标记，从而在分裂后，相同的基因在新细胞中能立即重新激活。
“不过，我们之前所不知道的是，分裂前被标记的基因是如何在分裂后重新激活的，”冷泉港实验室的David L. Spector教授说。通过观察和测定一个细胞在分裂前其中的单个基因位点（基因特定的染色体位置）的激活动力学，并与在新的子细胞中相同基因重新激活的动力学进行比较，Spector和他的团队现在得到了问题的答案。他们的研究结果发表在10月9号的《Nature Cell Biology 》上。
毕赤酵母SMD1168H菌种在细胞分裂或有丝分裂过程中，细胞重所有基因的活性出现暂时的中断。细胞的染色质——缠绕在组蛋白（折叠DNA的蛋白质）上的染色体DNA——变得非常紧凑；大多数在通常情况下粘附在染色质上以保持基因表达的蛋白质被剥离开；转录——DNA拷贝成为RNA的过程——停止。当分裂结束后，染色质在新的细胞中重新压缩或散开，转录调节蛋白进入到染色质的特定位点，基因开始一轮的转录。
一、毕赤酵母SMD1168H菌种蛋白芯片技术的基本原理
蛋白芯片技术的基本原理是将各种蛋白质有序地固定于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上成为检测用的芯片，然后，用标记了特定荧光抗菌素体的蛋白质或其他成分与芯片作用，经漂洗将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去，再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系，由此达到测定各种蛋白质功能的目的。为了实现这个目的，首先必须通过一定的方法将蛋白质固定于合适的体上，同时能够维持蛋白质天然构象，也就是必须防止其变性以维持其原有特定的生物活性。另外，毕赤酵母SMD1168H菌种由于生物细胞中蛋白质的多样性和功能的复杂性，开发和建立具有多样品并行处理能力、能够进行快速分析的高通量蛋白芯处技术将有利于简化和加快蛋白质功能研究的进展。
二、生成盐复合物沉淀法
⒈金属复合盐法
许多有机物质包括蛋白在内，在碱性溶液中带负电荷，能与金属离子形成沉淀。根据有机物与它们之间的作用机制，可分为羧酸、胺及杂环等含氮化合物类，如铜锌镉；亲羧酸疏含氮化合物类，如概镁铅；亲硫氢基化合物类，如汞银铅。蛋白质-金属离子复合物的重要性质是它们的溶解度对溶液的介电常数非常敏感，调整水溶液的介电常数（如加入有机溶剂），即可沉淀多种蛋白。
⒉有机盐法
含氮有机酸如苦味酸、苦酮酸、鞣酸等能与有机分子的碱性功能团形成复合物而沉淀析出。但此法常发生不可逆的沉淀反应，故用于制备蛋白质时，需采用较温和的条件，有时还需加入一定的稳定剂。
⒊无机复合盐法
如磷钨酸盐、磷钼酸盐等。
毕赤酵母SMD1168H菌种以上盐类复合物都具有很低的溶解度，极易沉淀析出。若沉淀为金属复合盐，可通以H2S使金属变成硫化物而除去，若为有机酸盐或磷钨酸盐，则加入无机酸并用乙醚萃取，把有机酸和磷钨酸等移入乙醚中除去，或用离子交换法除去。值得注意的是此类方法常使蛋白质发生不可逆沉淀，应用时必须谨慎。
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