中国微生物菌种查询网链孢囊菌种分离与鉴定！
小吴 / 2019-06-15 09:27:36
中国微生物菌种查询网本文论述了从链孢囊菌R-588A的发酵液中提取、分离抗肿瘤抗生素链孢囊菌R-588A的方法;分析与研究了R-588A的理化性质 及有关的光谱数据,从化学方面与葱环类抗生素进行了 比较, 结果认为RR-588A与洋红霉素I基本相同。在筛选新的抗肿瘤抗生素的过程中, 我们从链孢囊菌R-588A的发酵液中提取分离出一个具有抗肿瘤作用的抗生素R-588A。现将R-588A的分离、理化性质与鉴别的研究结果报告如下：
一、R-588A的分离
将链孢囊菌R-588A的发酵液过滤,取菌丝用丙酮浸泡,滤取丙酮浸液,低温浓缩,把除去丙酮后的水液用2N的氢氧化钠调 pH8～8.5,用1/4体积的氯仿分多次提取,合并氯仿提取液,低温去氯仿,得到棕红色复合游离碱粉末,用少量0.3N氯化氢甲醇将其溶解, 再用5倍量体积的无水乙醚沉淀,得到橙红色复合盐酸盐 沉淀,再将该沉淀溶于少量的氯仿一甲醇一水( 32:95:1.6)溶液中,在80～100目的青岛硅胶柱上进行层析, 并以相同的溶液洗脱,分别收集A、B、C三个橙红色色带的洗脱液, 除去溶剂,则得到A、B、C三个成分的橙红色粉末,本文主要叙述A成分的分离鉴别。
二、R-588A的理化性质与鉴别
R-588A的盐酸盐易溶于水,溶于甲醇、乙醇,一般不溶于其他有机溶媒,于甲醇中可析出橙红色针状结晶, 熔点为189～191 ℃(分解);[a]v22=+305(CI%甲醇)。菌株R58在分类上应归于链孢囊菌,与文献报导的该属菌株比较,发现与链抱囊菌C-31751相似。两菌不但形态和细胞 化学组分近似,其培养特征也近似, 相似点为: 生长在合成培养基上,多数不存在气生 菌丝,在少数培 养基上呈粉红色,基内菌丝桃红色或橙色,无可溶性色素;在有机培养基上,气生菌丝粉红色, 基内菌丝桃红紫色或深紫色。其生化反应也是相同的,如在碳源利用上,两菌都能利用阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、 葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、蔗糖、乳糖、淀粉、甘露醇、甘油、肌醇;不能利用棉子糖二山梨糖、山梨醇、卫矛醇、水杨昔。
在对氯化钠的影响上,两菌在含o%和0.5%氯化钠培养基上生长中等,在含1%和1.5%氯化钠培养基上生长受限制,在含2.5% 氯化钠培养基上不生长。总之,菌株R588的形态、培养特征、细胞化学组分、生化反应和抗菌谱都与链抱囊菌C-31751相近似。定名为紫红链孢囊菌R-588(Streptosporangium uiolaceorubrum Ruan and Zhang-R588)。
其游离碱为棕红色粉末,溶于氯仿、乙酸乙醋、吡啶,微溶于丙酮,不溶于水,于氯仿中可析出棕红色针状结晶,熔点为205～208℃(分解)
R一588A具有指示剂性质,酸性为橙黄色,碱性呈暗紫色。
紫外及可见光吸收光谱表现为典型的经基葱醒的特征性吸收峰,见图 1, 236( 788 ),256(552 ),295 (267 ),495(310),528 (215 ) 毫微米(甲醇)。
从图2的红外吸收光谱中可以见到;它具有脂肪族酮基特征吸收峰(1710-1715cm,), 有醌基和芳香族吸收峰(1600-1620cm-1)。
