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origami B(DE3)

origami B(DE3)

  • 平台编号:bio-82276
  • 规格:冰袋泡沫盒快递
  • 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
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货期:款到1-3天出库
运输:冰袋泡沫盒快递
培养方式:LB,37℃
保存:1ml甘油管,-80℃


基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522:: Tn10 trxB (KanR, TetR)

基本信息:
抗性:卡那  四环素
培养基:LB
菌株类别:大肠杆菌克隆菌
培养条件:37℃,有氧,LB
质粒转化:42℃热激
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:用于基因表达
备注:

菌株介绍
Origami B系列菌株同样具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突变,但是该菌株是来源于BL21的lacZY基因突变株。所以,Origami B系列是集合BL21,Tuner和Origami三种细胞株的优点于一身。
在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。
TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。
Origami B(DE3)细胞来源于含有lacZY基因突变的BL21菌株,能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。
形成二硫键,促溶蛋白

注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用本产品的甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。

安瓿瓶冻干管打管说明
 
一、打管说明
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长。
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与中国微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。

  西林瓶和甘油冻存管打管说明
 
二、西林瓶菌种打管复活操作步骤
1、用 75%酒精棉擦拭西林瓶表面进行消毒。 
2、在生物安全柜中打开铝制瓶盖和胶盖。 
3、用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(《菌种说明书》中固体培养基去掉琼脂即可)于西 林瓶中将冻干菌粉全部溶解。 
4、将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中的 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。
5、将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养,以液体培养结果为准。
三、甘油冻存管菌种打管复活操作步骤 
1、准备好推荐的菌种培养基(见《菌种说明书》)。
2、将冻存管下半部浸入 37℃温水中轻轻摇动,使冷冻状态的菌种悬液迅速融化。如果收到菌 种冻存管时菌悬液是融化状态则需要立即进行转接培养。 3、用 75%酒精棉擦拭冻存管表面进行消毒。
4、在生物安全柜中打开冻存管瓶盖,用无菌吸管吸取全部菌悬液,均匀涂布到 2 支试管斜面 或平板上。 
5、将斜面试管或平板于推荐条件下静置培养。对于生长缓慢的菌种应持续培养 2 周至更长的 时间。
四、注意事项 
1、 所有打管操作都需要无菌操作。需由专业微生物技术人员在相应防护设备中进行,生物危 害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作。 
2、 西林瓶和冻存管打开后需一次用完,不能留存。 
3、 菌种经过冻干保藏后,处于休眠状态,需要转接 2-3 代恢复活力。
4、 大部分冻干菌种会在培养几天后生长。有些菌种第一代恢复生长时会有较长的延迟期,培养此类菌种时需要将培养时间延长至正常培养时间的双倍时长,甚至 2 周至更长的时间。