体外诊断试剂国家标准物质使用说明书
结核分枝杆菌利福平耐药基因检测试剂用国家参考品
National Reference for detection of gene associated with rifampicin resistance in Mycobacterium tuberculosis
【批号】230033-201107
【性状】无色液体
【用途】本参考品是由对利福平耐药或敏感的结核分枝杆菌 菌株经培养制备而成的灭活细菌悬液。可用于结核分枝杆菌 利福平耐药基因检测试剂的质量控制。本参考品适用于以核 酸为检测样本的单一结核分枝杆菌利福平耐药基因检测试剂 和结核分枝杆菌多耐药基因检测试剂(如芯片法)的质量评 价。如上述检测试剂盒同时具备结核和非结核分枝杆菌鉴别 的功能,还需采用结核分枝杆菌 PCR 检测试剂盒用国家参考 品进行检测。
【包装】冻存管和离心管
【规格】本参考品共 44 支样品,组成如下:
1、参考品组成及浓度 类别 编号 菌株编号 (CMCC) 浓度 规格 支数 备注
阴性参考品 N1 95102
N2 95103
N3 95104
N4 95105
N5 95106
N6 95119
N7 95121
N8 95122
N9 95123
N10 95125 10E5 个菌/mL 1mL/支 10 10 份均为对利福平敏感的结核分枝杆菌
阳性参考品 R1 94002’ 10E5 个菌/mL 1mL/支 17 ropB 531
R2 94003’ ropB 516
R3 94004’ ropB 531
R4 94008’ ropB 526
R5 94010’ ropB 526
R6 94011’ ropB 526
R7 94015’ ropB 531
R8 94019’ ropB 516
R9 94020’ ropB 531
R10 94288’ ropB 526
R11 95377’ ropB 522
R12 95577’ ropB 510 511 512 缺失
R13 94024’ ropB 526
R14 94286’ ropB 531
R15 95113’ ropB 513
R16 95329’ ropB 533
R17 95581’ ropB 517 518 缺失
最低检出量参考品 SR 94008’ 1×105 个菌/mL 1mL/支 1 混合菌液参考品
S 93009’ 1×105 个菌/mL 1mL/支 1 混合菌液参考品
SR单 94002’ 1.0×107 个菌/mL 1mL/支 1 单细胞耐药菌
精密性参考品 J 94019’ 1×106 个菌/mL 1.3ml/支 1
2、阳性参考品基因突变信息 序号 参考品编号 菌株编号 利福平(R)、异烟肼(I)药敏试 验 和基因突变位点
1 R1-IR-1 94002' IR(rpoB531、inhA-15)
2 R2-IR-2 94003' IR(rpoB516、katG315) 3 R3-IR-3 94004' IR(rpoBB531、inhA-15)
4 R4-IR-4 94008' IR(rpoB526、katG315)
5 R5-IR-5 94010' IR(rpoB526、katG315)
6 R6-IR-6 94011' IR(rpoB526、katG315/inhA-15)
7 R7-IR-7 94015' IR(rpoB531、inhA-15)
8 R8-IR-8 94019' IR(rpoB516、katG315) 9 R9-IR-9 94020' IR(rpoB531、katG315)
10 R10-IR-10 94288' IR(rpoB526、katG315)
11 R11-IR-11 95377' IR(rpoB522、katG315)
12 R12-IR-12 95577' IR(rpoB510 511 512 缺失、 katG315)
13 R13-IR-13 94024' IR(rpoB526、inhA-15/katG315)
14 R14-IR-14 94286' IR(rpoB531、inhA-8/ahpC-12)
15 R15-R-1 95113' R(rpoB513)
16 R16-R-2 95329' R(rpoB533)
17 R17-R-3 95581' R(rpoB517 518 缺失)
【使用方法和要求】
一、使用方法 1、按结核分枝杆菌利福平耐药基因检测试剂的使用说明书 操作。 2、不同比例敏感菌和耐药菌的混合菌液参考品(S和SR)检 测前根据需要,按不同细菌含量和各种耐药比例进行配制。 如下表:
细菌含量 耐药% 耐药% 耐药% 耐药% 耐药% 耐药%
1.0× 10E4 CFU/mL 0% 5% 25% 50% 75% 100%
1.0× 10E3 CFU/mL 0% 5% 25% 50% 75% 100% 1.0× 10E2 CFU/mL 0% 5% 25% 50% 75% 100% 3、单细胞耐药菌液参考品(SR单)检测前根据需要,按不同 细菌含量配制,如 1.0×10E5 个菌/mL、1.0×10E4 个菌/mL、1.0 ×10E3 个菌/mL等。
4、精密性(重复性)参考品临用前用灭菌生理盐水进行 10 倍稀释后,平行检测 10 份。
二、要求 阴性参考品符合率:应全部呈利福平敏感。 阳性参考品符合率:试剂盒中设计的基因突变位点应能全部 检出。如试剂盒中设计的基因突变位点未包含在本参考品的 阳性参考品中,用本参考品进行检验的同时,还需采用企业 参考品中包含该基因突变位点的样本进行检验。
精密度(重复性):CV 值应不高于 15%(n=10)。
最低检出限:企业自行拟定。
【储藏条件】长期保存应置于-20℃及以下。
【注意事项】
1、本参考品于室温解冻后使用。
2、本参考品具生物危害风险,应按传染性物质规定处理 。
3、本参考品应避免反复冻融。 请按说明书规定使用,若做他用,用户需自行证明其适用性。